本篇目录：
- 1、如何从重组大肠杆菌中提取出淀粉酶粗酶液?
- 2、如何从产酶菌丝中提取纤维素酶?
- 3、...平板划线分离已经做完了,怎么把菌制成菌液,怎么进一步制成粗酶...
- 4、小麦淀粉酶的提取实验原理
- 5、DNA粗提取实验步骤?
- 6、从组织细胞中获得酶的粗提取样品常有哪些方法
如何从重组大肠杆菌中提取出淀粉酶粗酶液?
1、蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。
2、取10粒萌动的小麦种子放入研钵中， 用量筒取10ml蒸馏水作为淀粉酶提取液总量（包括研钵清洗、种子研磨），分三次加入，将小麦研成浆状，用脱脂棉过滤于试管中，摇匀。 滤液静置5-10min ，上清液为淀粉酶的提取液。
3、样本采集：你可设计以富含淀粉的植物为主，这其中的细菌淀粉分解株分离率比较高，也可采集土壤等。
如何从产酶菌丝中提取纤维素酶?
1、土样采集 土样的采集要选择富含纤维素的环境， 这是因为在纤维素含量丰富的环境， 通常会聚集较多的分解纤维素的微生物。
2、挑选透明圈直径和菌落直径比较大的单菌落进行三角瓶固态发酵再筛选，得到了产纤维素酶活力很高的里氏木霉91-3菌株。纤维素酶菌种易退化，退化后其产酶力明显降低，其原因可能有三个方面：①经诱变筛选的菌种发生回复突变。
3、rpm离心后取上清液测酶活力，然后再将菌体用无菌水洗几次后，破壁，用水溶解振荡，再离心取上清测酶活，比较下发酵液中的酶量和菌体内的酶量。
4、纤维素酶是胞外酶，用诱导的方法，让细菌产生这种酶，再从培养液中提取。细菌内有纤维素酶的基因，它就能产生这种酶。但要让细菌产生纤维素酶是有条件的，就是培养液中必须有纤维素，它才能产生纤维素酶。
5、B．可从富含腐殖质的林下土壤中取样筛选产纤维素酶菌。C．选择培养基中应含有大量的蔗糖或淀粉提供生长营养。D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秤可提高其饲用价值。答案为C。
6、确定源纤维素酶基因、获得纤维素酶基因。确定源纤维素酶基因：需要寻找并确定具有耐热纤维素酶活性的基因。获得纤维素酶基因：可以通过PCR扩增或基因合成的方式获得目标基因的DNA序列。
...平板划线分离已经做完了,怎么把菌制成菌液,怎么进一步制成粗酶...
②称取土壤10克，放入装有100毫升无菌水的锥形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制细菌生长。振荡10分钟，制成10-1菌悬液。按照连续稀释分离法，进一步制成10-3菌悬液。
倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。
倒平板，溶化牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板，水平静置待凝。在酒精灯光焰上灼烧接种环，待冷，取一接种环金黄葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。
小麦淀粉酶的提取实验原理
1、实验原理 淀粉酶是水解淀粉（1→4）糖苷键的一类酶的总称。
2、选用萌发的小麦种子提取酶溶液的原因是小麦种子萌发时形成大量的淀粉酶。
3、实验原理 淀粉在唾液淀粉酶的催化作用下，能够水解成麦芽糖。在煮沸的条件下，斐林试剂能使麦芽糖氧化，自身还原成砖红色的氧化亚铜沉淀。
4、吸取上述淀粉酶原液10mL，放入50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于淀粉酶总活力的测定。取干燥种子或浸泡5小时后的小麦种子1g，进行淀粉酶的提取，提取方法同上。
DNA粗提取实验步骤?
细胞破碎：通过机械破碎、超声波处理或细胞裂解液等方法，将细胞破碎，并释放其中的DNA。DNA溶解：将破碎后的细胞加入适量的缓冲溶液，使DNA分子解离并溶于溶液中。
DNA提取（粗提取）酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb 甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中，并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，絮状物会缠在玻璃棒上。
（1）应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤。本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果。（2）溶解细胞核内dna。加2 mol/l的nacl溶液并用玻棒搅拌。（3）析出dna黏稠物并过滤。
特别提醒：若以植物为实验材料，步骤上大致相同，在材料的处理上有几点不同：一是增加研磨步骤，目的是破坏细胞壁；二是加入洗涤剂，目的是溶解细胞膜及核膜；三是加食盐，可加速细胞膜及核膜的破裂。
从组织细胞中获得酶的粗提取样品常有哪些方法
1、酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。
2、如果是胞外酶，这就方便多了，只要收集微生物和细胞的培养液进行分离和提纯就可以了。如果酶在细胞内(称胞内酶)，则必须研碎细胞，才能把酶提取出来。
3、去掉细胞壁后加入清水使之吸水涨破。用差速离心法分离细胞器，再破换细胞器，然后提取。用萃取等化学方法。注意温度、有些溶剂会损害pr。有的酶有辅酶或辅基，可能会分离。
4、分离细胞器通常采用差速离心法。差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低，让较大的颗粒沉降到管底，小的颗粒仍然悬浮在上清液中。
5、如何得到高产量RNA粗制品：优化实验条件：如酵母细胞的数量、破碎方法、沉淀、洗涤等参数，以得到最佳的RNA提取条件。增加 RNA 所含量：将多个 RNA 样品汇集在一起提取，可增加 RNA 所含量。
6、DNA提取分为三个基本步骤，每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。利用研磨或者超声破碎细胞，并通过加入去污剂以除掉膜脂。
到此，以上就是小编对于提取的粗酶液可以保存多久的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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