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如何培养巨噬细胞传代细胞系
培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞，以小鼠腹腔取材法最为实用，其法如下：实验前三天，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml（勿注入肠内）。引颈杀死动物，手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3～5秒。
为纯化培养细胞，去除其它白细胞，接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1～2次后，再加新Eagle培养液置37℃，5%CO2温箱中培养。
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
．DC培养用细胞因子：nGM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)：GM-CSF是一种造血生长因子，在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成，并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。
这一点不同于同是单核细胞系的U937细胞。 THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长，对培养基变化非常敏感，所以 尽量使用相同Ph的1640。
细胞传代的具体过程是什么?
取待传代的细胞。打开versene，用酒精灯外焰烧。烧吸管时距离酒精灯心远些，不要把渣滓带进去。把试剂拿入台子的时候，尽量平稳，不要让试剂碰到瓶口。
悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用离心法后，加入新培养基后再吹打分散进行传代 贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精，紫外照射30min。
此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿(瓶)内，再进行培养.这个过程就称为传代(passage)或者再培养(subculture)，对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。
细胞传代：随着培养时间的延长和细胞不断分裂，细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止。此时就需要将培养皿(瓶)中的细胞分成几份，重新接种到另外的培养器皿(瓶)内，再进行培养，这个过程就称为传代。
②原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需将原代细胞分开至多个新的培养瓶中，这个过程称为传代。初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。
动物细胞传代顺序
观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。加热PBS、versene、培养基，(提前做好) 瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。
分裂间期，染色体复制。分裂前期：核膜、核仁消失，染色体散乱排列。分裂中期：染色体受纺锤丝牵引整齐排列在赤道板上。
由单细胞动物到多细胞大致方向：单细胞如(草履虫)→腔肠动物(如珊瑚)→海绵动物→扁形动物→线形动物(猪肉绦虫)→棘皮动物(海星)→有脊索动物(文昌鱼)→脊椎动物(原口类→鱼类→两栖动物→爬行动物→哺乳动物→人)。
新课标课本不再说“10代以内的为原代，50代以内的为传代的”，但如果是非新课标版本上句话就对。
细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。
菌种转种、传代的要求和操作步骤是什么
器皿准备 培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿，如三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等，经洗涤、干燥、包装、灭菌后使用。
菌种传代操作规程 点燃酒精灯，在火焰旁的上方灼烧接种环。
取出接种棒，在火焰旁将培养基管棉塞堵上，然后将接种过细菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。将已接种毕的细菌管置35~37℃培养22~24小时，霉菌管一般置20~25℃霉菌培养箱内培养7日。
标准菌株：直接从官方菌种保藏机构获得并至少定义到属或种的水平的菌株。通常默认为第0代菌株。标准储备菌株：将标准菌株在实验室转接一代后得到的一套完全相同的独立菌株。通常为第1代或第2代菌株。
其方法步骤如下：首先，点燃酒精灯。将菌种和斜面培养基的两只试管平行放在左手上，用拇指与其它四指夹住，并使中指位于两试管之间，两试管的管口齐平（图9－5①）。
由第1级种转至第3级种的过程叫做转接菌种，也就是菌种传代培养。菌种需要丰富的营养物质，一般不同的蘑菇需要的无机盐等微量元素有一定区别。
到此，以上就是小编对于传代培养过程中应注意的问题以及对于污染的解决方案的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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